利用重組大腸桿菌取得大量目標基因的研究

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Title:	利用重組大腸桿菌取得大量目標基因的研究
Authors:	蔡雨利翁姿怡江建民
Contributors:	生物科技系
Keywords:	基因轉殖大腸桿菌高密度培養
Date:	2017
Issue Date:	2022-01-25 15:11:49 (UTC+8)
Abstract:	利用勝任細胞將所需的基因轉入大腸桿菌中，經由大腸桿菌的繁殖複製系統來大量複製我們需要的質體DNA。高密度培養可增加單位時間內體積重組DNA 的產率，如何在獲得高密度的同時取得較高的單位時間體積目標基因產率，是高密度培養過程中有待解決的問題，這與所選用的菌體、建構的表達系統、發酵時溶氧和培養基成份及培養溫度、質體穩定性、代謝副產物的限制及對比生長速率的控制等因素有關。本研究將含有目標基因的大腸桿菌進行活化，利用載體的特定基因進行選殖，以含有特定抗生素培養基進行劃盤篩選出要的單一菌落後接至試管，再接至搖瓶中，再來進入發酵槽中以逐級擴大培養方式得到一定數量的目標基因。探討不同的接菌量1% 、2.5%、 5%至發酵槽中結果顯示接菌量5%比起其它接菌量可在最短時間培養達到一定的菌量及損失較少的質體。發酵槽有添加抗生素會比沒有添加抗生素損失更多質體。發酵槽適當的饋料O.D.值可達到120，質體損失量較少，饋料不適當則會抑制大腸桿菌生長和造成大量質體的損失。
Relation:	2017 第十一屆嘉南藥理大學藥理學院師生研究成果發表會，起迄日：2017/05/02-2017/05/04
Appears in Collections:	[Pharmacy and Science] 2017 [Dept. of Biotechnology (including master's program)] Proceedings

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