Abstract: | 本研究欲以重組酵母菌進行生物轉化,生產金雀異黃酮的羥基化產物。透過融合Aspergillus oryzase P450 CYP57B3 基因和Saccharomyces cerevisiae 還原酶基因,並轉殖入酵母菌以獲得轉殖株。進而檢測轉植株轉化金雀異黃酮(Genistein,GE)和大豆苷元(Daidzein,DE)的能力。
藉由西方墨點法檢查重組蛋白是否有被生產,結果於120 kDa 附近有一條條帶被辨認到,符合融合蛋白的預測大小。另外以高效能液相層析儀(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)檢測培養液中,GE 及DE 被轉化的情況,從圖譜中得知反應物確實有被轉化, 於60-72 小時可達最高轉化率。並以2,2- 二苯基-1- 苦味胼基(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)對每個取樣點進行抗氧化能力比較,觀察結果並沒有顯著差異。 |