馬兜鈴酸檢測技術

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標題:	馬兜鈴酸檢測技術
作者:	登國智李紫綺蔣維哲吳承叡王貞雅
貢獻者:	嘉南藥理大學生物科技系
日期:	2015-05-05
上傳時間:	2018-03-27 10:48:58 (UTC+8)
摘要:	馬兜鈴酸(Aristolochic Acid，AA) 是一類具強烈致癌性和腎毒性的硝基菲羧酸，天然存在於如馬兜鈴屬(Aristolochia)及細辛屬(Asarum)等馬兜鈴科植物中，而這些植物曾廣泛地被用做中草藥材。我們整理三種新近發表的馬兜鈴酸檢測分析技術。馬兜鈴酸化合物本身不具螢光特性。Chan W. 等作者利用半胱胺酸使馬兜鈴酸化合物進行脫硝反應，產生可發出強烈螢光的衍生物；作者將反應條件最佳化，並證明半胱胺酸對馬兜鈴酸去硝基化反應產率優於其他方法。利用高效液相層析法/螢光偵測器(HPLC?FLD) 進行馬兜鈴酸檢測，對AA-I和AA-II的偵測極限分別是27.1ppb及25.4ppb，對真實樣品之定量結果與LC-MS 相當。 Yu F. Y. 等作者以AA-OVA(卵清蛋白)、AA-KLH(匙孔血藍蛋白) 為抗原注入兔子體內產生馬兜鈴酸多株抗體，建立間接競爭型ELISA(ciELISA)及直接競爭型ELISA(cdELISA)之檢測方法。本研究中AA-OVA於兔子血清中產生的抗體效價比AA-KLH高。以ciELISA測定馬兜鈴酸混合物、AA I 及AA II 之半抑制濃度(IC50)分別為1.2、0.7及18ng/mL；在0.25-5ppm 濃度範圍，添加回收率平均為86.5%。作者以ciELISA檢測12 個中草藥及減肥藥樣品，同時與HPLC 檢測結果相互印證。 Guo Z. 與 Zhang F. 等作者利用新的極性共聚方法合成矽基逆相/強陰離子交換混合模式材質 C18SAX，其表現出優異的水相相容性，且色譜柱效率與甲基選擇性媲美於商業產品SunFireTM C18 管柱；並經實驗結果表明疏水性作用和陰離子交換機制主導馬兜鈴酸的分離過程。利用C18SAX為固相萃取 (SPE) 管柱，對粗萃液中馬兜鈴酸 AA-I、AA-II 回收率分別為 72.36％、105.59％，相對標準偏差為 5.8％、1.1％。C18SAX 固相萃取管柱配合製備型 C18TDE 管柱，可純化得關木通中 AA-I、AA-II、AA-IIIa、AA-IVa，純度均達 93% 以上。證明 C18SAX 能從複雜基質中有效富集馬兜鈴酸組成。
關聯:	2015 第九屆嘉南藥理大學藥理學院師生研究成果發表會，起迄日：2015/05/05-2015/05/08，地點：嘉南藥理大學國際會議中心一樓
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