一種具洋菜糖樹脂結合能力之蛋白的結合情形研究

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標題:	一種具洋菜糖樹脂結合能力之蛋白的結合情形研究
作者:	盧郁蓁江建民
貢獻者:	嘉南藥理大學生物科技系
關鍵字:	快速的純化工具
日期:	2015-05-05
上傳時間:	2018-03-27 10:44:39 (UTC+8)
摘要:	本實驗室在之前純化豬環狀病毒的核?衣蛋白(Capsid protein,CAP )蛋白時，發現此融合蛋白對於以洋菜糖為基礎的樹脂有親和性的結合。我們構築了兩個融合蛋白，一個是將eGFP接在前端的eGFP-CAP，另一個則是將eGFP接在後端的dmCAP-eGFP來進行研究。其中將dmCAP蛋白N端減少41個的胺基酸，來改善表達量，且CAP與eGFP之間加入適當專一性蛋白?剪切位點，我們測試藉由CAP融合蛋白開發成為一種快速的純化工具之可能性。我們將構築好的質體轉殖到大腸菌，加入誘導劑誘導表達，將菌體破菌後之上層液進入填充有SP sepharose Resin(GE)的管柱進行純化，收集流出液和洗脫液，最後以SDS-PAGE電泳分析檢測。研究發現，此融合蛋白結合能力不及純化的CAP蛋白，這兩種構築的方式無法成為理想的快速純化工具。此結果也暗示著此融合蛋白與洋菜糖為基礎的樹脂的結合力可能與N端41個的蛋白質區域有關。
關聯:	2015 第九屆嘉南藥理大學藥理學院師生研究成果發表會，起迄日：2015/05/05-2015/05/08，地點：嘉南藥理大學國際會議中心一樓
显示于类别:	[藥理學院] 2015 第九屆嘉南藥理大學藥理學院師生研究成果發表會

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