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    標題: 一種具洋菜糖樹脂結合能力之蛋白的結合情形研究
    作者: 盧郁蓁
    江建民
    貢獻者: 嘉南藥理大學生物科技系
    關鍵字: 快速的純化工具
    日期: 2015-05-05
    上傳時間: 2018-03-27 10:44:39 (UTC+8)
    摘要: 本實驗室在之前純化豬環狀病毒的核?衣蛋白(Capsid protein,CAP )蛋白時,發現此融合蛋白對於以洋菜糖為基礎的樹脂有親和性的結合。我們構築了兩個融合蛋白,一個是將eGFP接在前端的eGFP-CAP,另一個則是將eGFP接在後端的dmCAP-eGFP來進行研究。其中將dmCAP蛋白N端減少41個的胺基酸,來改善表達量,且CAP與eGFP之間加入適當專一性蛋白?剪切位點,我們測試藉由CAP融合蛋白開發成為一種快速的純化工具之可能性。我們將構築好的質體轉殖到大腸菌,加入誘導劑誘導表達,將菌體破菌後之上層液進入填充有SP sepharose Resin(GE)的管柱進行純化,收集流出液和洗脫液,最後以SDS-PAGE電泳分析檢測。研究發現,此融合蛋白結合能力不及純化的CAP蛋白,這兩種構築的方式無法成為理想的快速純化工具。此結果也暗示著此融合蛋白與洋菜糖為基礎的樹脂的結合力可能與N端41個的蛋白質區域有關。
    關聯: 2015 第九屆嘉南藥理大學藥理學院師生研究成果發表會,起迄日:2015/05/05-2015/05/08,地點:嘉南藥理大學國際會議中心一樓
    顯示於類別:[藥理學院] 2015 第九屆嘉南藥理大學藥理學院師生研究成果發表會

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